一种定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法,属于白酒风味物质检测技术领域。本发明采用邻五氟苯甲基羟胺(PFBHA)衍生,顶空-固相微萃取(HS-SPME)同时萃取衍生,气相色谱-质谱(GC-MS)实现定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物。本发明准确度、精密度高,检测限低,并且定量检测反式-2-烯醛类和二烯醛类的种类达到14种,能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求,有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差别,为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。
1.一种定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法,其特征在于利用邻五氟苯甲基羟胺PFBHA衍生,顶空-固相微萃取HS–SPME,气相色谱-质谱GC-MS定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物,步骤为:(1)样品预处理:取酒样,用煮沸后冷却至室温的超纯水将酒样稀释至酒精度按体积计浓度为10%;准确吸取8mL稀释后的酒样,置于20mL顶空瓶中,加入8μL质量浓度为1.0724mg/L的内标对氟苯甲醛溶液和300μL的质量浓度为20g/L的衍生化试剂PFBHA溶液,旋紧瓶盖,待分析;(2)HS-SPME和GC-MS分析:顶空-固相微萃取:用自动进样装置进行样品HS-SPME,采用DVB/CAR/PDMS三相萃取头;HS-SPME的条件是在步骤(1)制备的待分析样品中加入3gxa0NaCl,萃取温度65°C,萃取时间为45min;取步骤(1)所得白酒酒样进行GC-MS检测;GC条件:载气He,纯度99.9995%,流速2mL/min,不分流进样;色谱柱:DB-Wax,尺寸为60m×0.25mm×0.25μm;进样口温度250°C,解吸附300s;升温程序为:50°C保持2min,以6°C/min升至100°C,保持0.1min,以2°C/min升至160°C,保持0.1min,以5°C/min升至230°C,保持15min;MS条件:电子电离EI,电子能量70eV,离子源温度230°C,SCAN模式扫描范围为35.00~380.00amu;质谱分析使用NIST05a.L数据库;(3)定性和定量分析:通过对比步骤(2)分析后的酒样所得结果,与反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品衍生后的保留时间,以及NIST05a.L数据库提供的质谱图对照,利用匹配度、特征离子以及保留时间进行定性分析;用选择特征定量离子SIM的方法对反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物进行积分;衍生产物有顺、反异构体的,以两个离子峰面积之和计算,以14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物特征离子峰与内标的特征离子峰m/zxa0319的峰面积之比为横坐标x,反式-2-烯醛类和二烯醛类与内标浓度之比为纵坐标y绘制曲线;通过绘制所得的曲线即可得到白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物定量检测的结果。
2.根据权利要求1所述定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法,其特征在于:所述14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物具体为:反式-2-戊烯醛衍生物;反式-2-己烯醛衍生物;反式-2-庚烯醛衍生物;反式-2-辛烯醛衍生物;反式-2-壬烯醛衍生物;反式-2-癸烯醛衍生物;反式-2-十一烯醛衍生物;反式-2-十二烯醛衍生物;反,反-2,4-己二烯醛衍生物;反,反-2,4-庚二烯醛衍生物;反,顺-2,6-壬二烯醛衍生物;反,反-2,4-辛二烯醛衍生物;反,反-2,4-壬二烯醛衍生物;反,反-2,4-癸二烯醛衍生物。技术领域
本发明涉及一种利用气相色谱-质谱定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法,特别是涉及一种利用邻五氟苯甲基羟胺(PFBHA)衍生,顶空-固相微萃取(HS-SPME)同时萃取衍生,气相色谱-质谱(GC-MS)定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法,属于白酒风味物质检测技术领域。
背景技术
醛类是饮料酒香气重要成分,由微生物发酵及脂肪和醇类氧化产生。反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物属于不饱和醛类,在饮料酒中的含量低,但由于其较低的阈值,对饮料酒的香气有很大贡献。目前,中国白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物定量检测领域的研究较少,醛类检测主要集中在总醛和饱和醛类上,还没建立针对中国多种香型白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类的定量方法。国内关于反式-2-烯醛类和二烯醛类研究主要是定性研究,在我国清香型和酱香型白酒中共定性出6种反式-2-烯醛类和6种二烯醛类化合物,但没有对其进行准确定量。已经有许多方法用于定量检测饮料酒中的反式-2-烯醛类和二烯醛类,包括气相色谱-质谱及衍生剂联用气相色谱-质谱或联用高效液相色谱法(HPLC)等方法。目前为止,关于葡萄酒、啤酒以及葡萄渣蒸馏酒中GC-MS和二烯醛类的研究都比较多。中国白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类的定量研究目前还尚属空白。本发明运用PFBHA作衍生化试剂,HS-SPME同时萃取衍生与GC-MS联用的方法共定量我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物。该方法准确度、精密度高,检测限低,并且定量检测反式-2-烯醛类和二烯醛类的种类达到14种,能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求,有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差别,为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。鉴于此,为了更好的分析白酒中香气成分,提高白酒品质,发明一种定量我国白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类的方法十分必要。
发明内容
本发明所解决的技术问题是提供一种利用PFBHA作衍生化试剂,HS-SPME同时萃取衍生与GC-MS联用的方法共定量我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法。该方法准确度、精密度高,检测限低,并且定量检测反式-2-烯醛类和二烯醛类的种类达到14种,能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求,有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差别,为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。本发明的技术方案,一种定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法,利用邻五氟苯甲基羟胺PFBHA衍生,顶空-固相微萃取HS–SPME,气相色谱-质谱GC–MS定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物,步骤为:(1)样品预处理:取酒样,用煮沸后冷却至室温的超纯水将酒样稀释至酒精度按体积计浓度为10%;准确吸取8mL稀释后的酒样,置于20mL顶空瓶中,加入8μL浓度为1.0724mg/L的内标对氟苯甲醛溶液和300μL浓度为20g/L的衍生化试剂PFBHA溶液,旋紧瓶盖,待分析;(2)HS-SPME和GC–MS分析:顶空-固相微萃取:用自动进样装置进行样品HS-SPME顶空-固相微萃取,采用DVB/CAR/PDMS三相萃取头;HS-SPME的条件是在步骤(1)制备的待分析样品中加入3gxa0NaCl,萃取温度65°C,萃取时间为45min;取步骤(1)所得白酒酒样进行气相色谱-质谱GC-MS检测;GC条件:载气He,纯度99.9995%,流速2mL/min,不分流进样;色谱柱:DB-Wax,尺寸为60m×0.25mm×0.25μm;进样口温度250°C,解吸附300s;升温程序为:50°C保持2min,以6°C/min升至100°C,保持0.1min,以2°C/min升至160°C,保持0.1min,以5°C/min升至230°C,保持15min;MS条件:电子电离EI,电子能量70eV,离子源温度230°C,SCAN模式扫描范围为35.00~380.00amu;质谱分析使用NIST05a.L数据库;(3)定性和定量分析:通过对比步骤(2)分析后的酒样所得结果,与反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品衍生后的保留时间,以及NIST05a.L数据库提供的质谱图对照,利用匹配度、特征离子以及保留时间进行定性分析;用选择特征定量离子SIM的方法对反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物进行积分;衍生产物有顺、反异构体的,以两个离子峰面积之和计算,以14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物特征离子峰与内标的特征离子峰(m/zxa0319)的峰面积之比为横坐标(x),反式-2-烯醛类和二烯醛类与内标浓度之比为纵坐标(y)绘制曲线;通过绘制所得的曲线即可得到白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物定量检测的结果。所述14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物具体为:反式-2-戊烯醛衍生物;反式-2-己烯醛衍生物;反式-2-庚烯醛衍生物;反式-2-辛烯醛衍生物;反式-2-壬烯醛衍生物;反式-2-癸烯醛衍生物;反式-2-十一烯醛衍生物;反式-2-十二烯醛衍生物;反,反-2,4-己二烯醛衍生物;反,反-2,4-庚二烯醛衍生物;反,顺-2,6-壬二烯醛衍生物;反,反-2,4-辛二烯醛衍生物;反,反-2,4-壬二烯醛衍生物;反,反-2,4-癸二烯醛衍生物。本发明的有益效果:本发明运用PFBHA作衍生化试剂,HS-SPME同时萃取衍生与GC-MS联用的方法共定量我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物。该方法准确度、精密度高,检测限低,并且定量检测反式-2-烯醛类和二烯醛类的种类达到14种,能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求,有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差别,为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。
附图说明
图1-a、1-b和1-cxa0为14种反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品与PFBHA反应的衍生产物离子图谱。附图标记说明:1和1’:反式-2-戊烯醛衍生物;2和2’:xa0反式-2-己烯醛衍生物;3和3’:xa0反式-2-庚烯醛衍生物;4和4’:xa0反式-2-辛烯醛衍生物;5:反式-2-壬烯醛衍生物;6和6’:xa0反式-2-癸烯醛衍生物;7和7’:xa0反式-2-十一烯醛衍生物;8和8’:xa0反式-2-十二烯醛衍生物;xa09和9’:反,反-2,4-己二烯醛衍生物;10和10’:反,反-2,4-庚二烯醛衍生物;11:反,顺-2,6-壬二烯醛衍生物;xa012和12’:反,反-2,4-辛二烯醛衍生物;13和13’:反,反-2,4-壬二烯醛衍生物;14和14’:反,反-2,4-癸二烯醛衍生物;内标:对氟苯甲醛衍生物。
具体实施方式
实施例1某浓香型白酒Axa0(1)样品预处理:用煮沸后冷却至室温的超纯水将A酒酒样稀释至酒精度10%vol,准确吸取8mL置于20mL顶空瓶中,加入8μL的1.0724mg/L内标对氟苯甲醛溶液和300μL的20g/L衍生化试剂PFBHA溶液,旋紧瓶盖,待分析。A酒中14种反-2-烯醛和二烯醛类化合物含量见表1。(2)HS-SPME和GC-MS分析:用自动进样装置(MPS2)进行样品HS-SPME顶空-固相微萃取同时萃取衍生化,采用DVB/CAR/PDMS三相萃取头。HS-SPME同时萃取衍生化的条件是酒样稀释到酒精度10%vol,样品中加入3gxa0NaCl,同时萃取衍生化温度65°C,萃取衍生化时间45min。GC条件:载气He(纯度99.9995%),流速2mL/min,不分流进样;色谱柱:DB-Wax(60m×0.25mm×0.25μm)。进样口温度250°C,解吸附300s。升温程序为:50°C保持2min,以6°C/min升至100°C,保持0.1min,以2°C/min升至160°C,保持0.1min,以5°C/min升至230°C,保持15min。MS条件:电子电离(EI),电子能量70eV,离子源温度230°C,SCAN模式扫描范围为35.00~380.00amu。质谱分析使用NIST05a.L数据库。(3)定性和定量分析:通过对比步骤(2)分析后的酒样所得结果,与反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品衍生后的保留时间,以及NIST05a.L数据库提供的质谱图对照,利用匹配度、特征离子以及保留时间进行定性分析;用选择特征定量离子SIM的方法对反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物进行积分;衍生产物有顺、反异构体的,以两个离子峰面积之和计算,以14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物特征离子峰与内标的特征离子峰,m/zxa0319,的峰面积之比为横坐标(x),反式-2-烯醛类和二烯醛类与内标浓度之比为纵坐标(y)绘制标准曲线;反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品与PFBHA反应的衍生产物离子图谱如图1所示。通过绘制所得的曲线即可得到白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物定量检测的结果。A酒中14种反-2-烯醛和二烯醛类化合物含量见表1。表1xa0某浓香型A酒中反-2-烯醛和二烯醛类含量(μg/L)ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="548"/>应用实施例1检测实施例1中反式-2-烯醛类和二烯醛类的线性范围,回收率,精密度和检测限度。准确吸取8mL酒精度10%vol的实施例1的A酒精溶液置于20mL顶空瓶中,分别向其中加入各合适浓度的待定量的14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的标准储备液,按浓度减半逐级稀释成10个浓度梯度,按照样品的处理方法进行衍生,进样分析。用选择特征定量离子(SIM)的方法对反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物进行积分,衍生产物有顺、反异构体的,以两个离子峰面积之和计算。选取信噪比为3时的质量浓度作为检测限。以14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物特征离子峰与内标的特征离子峰(m/zxa0319)的峰面积之比为横坐标(x),反-2-烯醛和二烯醛类与内标浓度之比为纵坐标(y)绘制标准曲线。表2xa0白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物回归方程和相关参数ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="594"/>对同一白酒样品加标进行定量(n=3),分别进样,计算加标回收率,同时通过重复性试验计算该方法的相对标准偏差(RSD)。表3xa0白酒中反-2-烯醛和二烯醛类化合物的加标回收率和相对标准偏差(n=3)ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="570"/>从表2和表3可知利用PFBHA作衍生化试剂,HS-SPME同时萃取衍生与GC-MS联用的方法共定量白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法准确度、精密度高,检测限低,能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求,有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差别,为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。